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在扫描电镜（SEM）中，为了对比同一区域在不同放大倍数下的图像细节差异，可以使用图像处理软件实现“多重图层叠加”对比。这种方法在分析结构演化、材料界面或缺陷局部特征时非常实用。以下是完整的操作思路：

一、采集图像时的准备工作

确保成像区域相同

在不同放大倍数下拍摄图像时，务必保持中心位置一致。可使用样品台坐标精确定位，或以标记结构为参照。

保存图像格式一致

可使用 .tif 或 .png 格式，避免压缩丢失细节。

标记放大倍数、图像尺寸

命名时标注倍率如：sample_1kx.tif、sample_10kx.tif，方便后续对齐。

二、使用图像处理软件叠加图层

可使用如下任一工具进行叠加操作：

ImageJ / Fiji

Photoshop

Igor Pro（借助图像波形叠加）

GIMP、MATLAB、Python 等也可实现

三、在 ImageJ / Fiji 中操作示例

步骤 1：导入图像

打开软件，File → Open 依次导入不同倍率图像。

步骤 2：对齐图像

使用 Plugins → Registration → StackReg 或 TurboReg 插件自动对齐；

或手动调整位置和缩放，让高倍图像与低倍图像对齐。

步骤 3：叠加图层

Image → Color → Merge Channels 将不同图像分配到 R/G/B 通道，实现色彩叠加；

或 Image → Overlay → Add Image 添加为透明图层进行对比；

可调整图层透明度，使细节在上下图中切换可见。

步骤 4：设置图层混合或遮罩

用 ROI 工具选定某一区域，在高倍图中展示详细结构，其他区域保持低倍图，形成“局部高分辨叠加”效果；

可做图层遮罩（mask）控制显示范围。