扫描电镜观察生物样品时需要注意哪些问题?
日期:2023-05-26
观察生物样品时,使用扫描电镜(SEM)需要注意以下问题:
样品固定和处理:生物样品在SEM观察前需要进行适当的固定和处理,以保持其形态和结构的稳定性。常见的处理方法包括化学固定、冷冻固定、冻干等,具体方法应根据样品的性质和研究目的来选择。
去除水分:SEM观察需要在真空或低压环境下进行,因此生物样品中的水分需要被去除。常见的方法包括冷冻干燥(冻脱水)或使用无水溶剂进行干燥。
导电性增强:生物样品通常具有较差的导电性,因此需要在SEM观察前增强其导电性。这可以通过金属喷涂、碳喷涂或金属蒸镀等方法来实现,以形成导电的表面。
选择适当的工作距离和加速电压:SEM的工作距离和加速电压对于生物样品的观察至关重要。适当的工作距离和加速电压可以帮助获得清晰的图像,并避免样品受到电子束的热损伤。
防止辐照损伤:电子束辐照可能会对生物样品造成损伤,因此需要控制电子束的扫描时间和电子束的功率。尽量选择低电流和较短的扫描时间,以减少样品的辐照损伤。
选择合适的检测器:SEM常用的检测器包括二次电子检测器(SE)和反射电子检测器(BSE)。根据需要观察的样品特性和细节,选择合适的检测器以获得高质量的图像对比度和细节。
避免图像伪影:在观察生物样品时,应注意避免图像伪影的产生。这可能由于样品表面的充电效应、水分残留或不正确的样品制备导致。在样品制备和SEM操作过程中,应注意减少充电效应和水分残留,以获得更准确的图像。
优化参数和实验条件:根据具体样品和观察需求,不断优化SEM的参数和实验条件。
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作者:泽攸科技
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